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        1. 教育裝備采購網
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          解析PCR現在又擴增不出來了怎么辦

          教育裝備采購網 2016-03-25 10:06 圍觀1429次

            PCR新手指南:PCR現在又擴增不出來了怎么辦?

            這個問題是常見的問題,就是一個PCR實驗一直都做得很好,停一段時間后再做就不行了。一通亂找原因后還是不行,很痛苦!

            找問題要從大到?。?

            1、PCR擴增體系問題

            用其他正在進行的且擴增正常的模板和引物證明PCR擴增體系沒有問題,即PCR反應混合物、水、取液器、PCR儀、操作等都是好的(陽性對照)

            2、引物問題

            用以前擴增產物做模板(稀釋50倍),證明引物沒有問題

            3、只是模板問題了。

            因為樣本降解的可能性比引物降解的可能性高得多。也可能是樣本中的抑制物過多(新鮮時沒有溶出來)。

            不要靠運氣找問題,先做第一條很重要。亂找問題常常讓人失去信心的。

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