紫外分光光度計，就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見光區意選擇不同波長的光。物質的吸收光譜就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些定波長的光能量，相應地發生了分子振動能躍遷和電子能躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質就有其有的、固定的吸收光譜曲線，可根據吸收光譜上的某些征波長處的吸光度的低判別或測定該物質的含量。
作原理
物質的吸收光譜本質上就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些定波長的光能量，相應地發生了分子振動能躍遷和電子能躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同。因此，每種物質就有其有的、固定的吸收光譜曲線，可根據吸收光譜上的某些征波長處的吸光度的低判別或測定該物質的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。
又因為許多物質在紫外-可見光區有征吸收峰，所以可用紫外分光光度法對這些物質分別行測定(定量分析和定性分析)。紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。
朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸收的基本定律，俗稱光吸收定律，是分光光度法定量分析的依據和基礎。當入射光波長定時，溶液的吸光度A是吸光物質的濃度C及吸收介質厚度l(吸收光程)的函數。
分光光度法
確定實驗條件，并在此條件下測得標準物質的吸收峰以及其對應波長值;再在選定的波長范圍內(，分別以(不同濃度)標準溶液的吸光度和溶液濃度為橫、縱坐標繪出化合物溶液的標準曲線得到其所對應的數學方程;接著在相同實驗條件下配制待測溶液，測得待測溶液的吸光度，用已獲得的標準曲線方程求出待測溶液中所需測定的化合物的含量
使用范圍
凡具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物，根據在定吸收波長處所測得的吸收度，可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定。
波長范圍
可見-紫外分光光度計。其應用波長范圍為200～400nm的紫外光區、400～850nm的可見光區。主要由輻射源(光源)、色散系統、檢測系統、吸收池、數據處理機、自動記錄器及顯示器等件組成。
應用
1 檢定物質
根據吸收光譜圖上的些征吸收，別是大吸收波長雖ax和摩爾吸收系數是檢定物質的常用物理參數。這在藥物分析上就有著很廣泛的應用。在內外的藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的大吸收波長和吸收系數載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。
2 與標準物及標準圖譜對照
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同溶劑中，在同條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同物質，則兩者的光譜圖應致。如果沒有標樣，也可以和現成的標 準譜圖對照行。這種方法要求儀器準確，密度，且測定條件要相同。
3 大吸收波長吸收系數的致性
4 純度檢驗
5 推測化合物的分子結構
6 氫鍵強度的測定
實驗證明，不同的性溶劑產生氫鍵的強度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不 同溶劑中氫鍵強度，以確定選擇哪種溶劑 。
7 絡合物組成及穩定常數的測定
8 反應動力學研究
9 在有機分析中的應用
有機分析是門研究有機化合物的分離、鑒別及組成結構測定的科學，它是在有機化學和分析化學的基礎上發展起來的綜合性學科。
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