四月，總是一個充滿魔力的時節?；ǘ奸_的繽紛艷麗，恨不得把世界妝扮成粉紅色的新娘?？輼渚挂脖鲂卵?，綠的活力四射。今天上海恒遠小編帶您了解實驗中的小知識：雙抗體夾心法實驗原理及實驗步驟!希望您會喜歡!
雙抗體夾心法(常用于測定抗原)實驗原理：
用特異性抗體包被于固相載體，經洗滌后加入含有抗原之待測樣品，如待檢樣品中有相應抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合，經保溫孵育洗滌后，即可加入酶標記特異性抗體，再經孵育洗滌后，加底物顯色進行測定，底物降解的量即為欲測抗原的量。
雙抗體夾心法實驗步驟：
一、材料準備：
1. 實驗材料：血清、血漿、體液
2. 實驗儀器：酶標比色計、96 孔板、移液槍、離心管、離心管盒
3. 所需試劑及試劑盒：碳酸鹽包被緩沖液、抗體球蛋白、吐溫-20、檸檬酸、硫酸
二、實驗操作方法：
1. 包被抗體：用包被緩沖液稀釋特異性抗體球蛋白至最適濃度(1～10 μg /ml)，每凹孔加 0.3 ml，4℃ 過夜，或 37℃ 水浴 3 小時，貯存冰箱。
2. 洗滌：移去包被液，凹孔用洗滌緩沖液(含 0.05% 吐溫-20)洗 3 次，每次 5 分鐘。
3. 每凹孔加入 0.2 ml 用稀釋緩沖液稀釋的含抗原的被檢標本，37℃ 作用 1～2 小時。
4. 洗滌：移去包被液，凹孔用洗滌緩沖液(含 0.05% 吐溫-20)洗 3 次，每次 5 分鐘。
5. 加入 0.2 ml 用稀釋緩沖液稀釋的酶標記特異性抗體溶液，37℃ 作用 1～2 小時或由預試實驗確定作用時間。
6. 洗滌：移去包被液，凹孔用洗滌緩沖液(含 0.05% 吐溫-20)洗 3 次，每次 5 分鐘。
7. 加入 0.2 ml 底物溶液于每個凹孔(OPD 或 OT)，室溫作用 30 分鐘(另作一空白對照，0.4 ml 底物加 0.1 ml 終止劑)。
8. 加終止劑：每凹孔加 2M H2SO4 或 2 M 檸檬酸 0.05 ml。
9. 觀察記錄結果：目測或用酶標比色計測定(OPD 用 492 nm)OD 值。
科研試劑---首選上海恒遠：
微量蛋白檢測系列：白介素類試劑盒,TNF類試劑盒,VEGF類試劑盒,腎損傷類試劑盒;
相關小分子檢測系列：皮質醇類試劑盒,HCY類試劑盒,T3,T4類試劑盒;
食品安全小分子檢測系列：慶大霉素ELISA檢測試劑盒,三聚氰胺ELISA檢測試劑盒,四環素ELISA檢測試劑盒,黃曲霉毒素ELISA檢測試劑盒;
抗體檢測系列：鏈球菌溶血素o抗體ELISA檢測試劑盒,AQP-Ab類試劑盒,HINI試劑盒;
特種蛋白檢測：近十個種屬的白蛋白,球蛋白ELISA檢測試劑盒。
