常用的固定劑種類很多，固定劑的正確選擇取決于被研究抗原的性質及所用抗體的特性。固定劑可分為兩類：有機溶劑和交聯劑。
有機溶劑：如乙醇和丙酮能夠去處脂 類物質使細胞脫水，把蛋白質沉淀在細胞結構上。
交聯劑：如多聚甲醛一般通過自由氨基基團把生物分子橋連起來，形成一個相互交聯的抗原網。許多人發現用交聯劑固定細胞效果較好，尤其是做免疫熒光的時候，當然沒有固定的規則可言。不過，單獨用多聚甲醛固定的細胞不能使抗體進入細胞內，因此，標本固定后必須用非離子去污劑透化標本。
方法一
1) 900 ml dd H20 500 ul 1N NaOH
2) Heat to 65-70℃
3) While stirring, add 40 g paraformaldehyde
4) Continue heating and stirring until paraformaldehyde is dissolved
5) Let cool to room temperature
6) Add 100 ml of 10X PBS
7) pH to 7.3 with HCl
8) Sterile with filter
9) Store at 4℃, protected from light
方法二
1)稱取40gPFA(多聚甲醛)溶于裝有500mlDEPC水的玻璃容器(燒杯或燒瓶)中，持續加熱。上海創賽科技提供多聚甲醛，Paraformaldehyde，商品編號：B11000407-25g，價格41.3元。
2)磁力攪拌至60-65℃，大約1-2小時可以溶解，使成乳白色懸液。上海創賽科技提供E22-MYP11-2A型智能恒溫磁力攪拌器，商品編號：E22-MYP11-2A，詢價。
3)用1.0mmol/L 的NaOH調PH至7.0使呈清亮狀(滴加)，再加入約500ml 2×PBS，充分混勻(在冰浴或冷水浴中)。上海創賽科技提供PBS緩沖液，商品編號：D16-1027378-2ml，價格23元。
4)檢測PH，過濾后定容至1000ml，室溫或4℃(保存備用)，使用前新鮮配制。
注意：
1.配制時應在通風條件下操作，并避免接觸皮膚及吸入(戴口罩及手套)，因PFA有較強的毒性，對粘膜及皮膚有刺激作用。
2.加熱時，溫度不可過 高，常為60-65℃。否則PFA降解失效，配制好的PFA雖可有效一點時間，但過久的液體，固定效果下降，應用前新鮮配制。
除了用DEPC水配制PFA外，也可以用滅菌蒸餾水或經DEPC處理的0.01-0.1%/L的PBS配制，方法及主要事項同上。上海創賽科技提供焦碳酸二乙酯，DEPC (Diethylpyrocarbonate)，1609-47-8，商品編號：B11000132-5ml，價格64.5元。
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