摘要:本發明公開了一種家蠶中部絲腺生物反應器雙啟動子通用型質粒及其構建方法和應用。獲得絲膠蛋白1基因啟動子、18s?rRNA基因啟動子、His?6序列、DDDDK、絲素輕鏈蛋白信號肽、絲素輕鏈基因3’末端序列、家蠶肌動蛋白基因A3啟動子、EGFP基因和SV40的3’末端序列,然后再順序連接構建成質粒,第一表達框包括A3啟動子、EGFP基因和SV40序列,第二表達框包括絲膠蛋白1基因啟動子、18s?rRNA基因啟動子、絲素輕鏈蛋白信號肽、His?6序列、DDDDK和絲素輕鏈基因3’末端序列,且在DDDDK和絲素輕鏈基因3’末端序列之間含有ApaI和NheI兩個酶切位點。本發明質粒減少了構建donor質粒的工作量,提高了家蠶絲腺生物反應器工作效率,提高了外源蛋白的表達量。
- 專利類型發明專利
- 申請人浙江大學;
- 發明人鐘伯雄;張玉玉;葉露鵬;
- 地址310027 浙江省杭州市西湖區浙大路38號
- 申請號CN201610290166.0
- 申請時間2016年05月04日
- 申請公布號CN106399363A
- 申請公布時間2017年02月15日
- 分類號C12N15/85(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;