摘要:本發明公開了一種用于表達T4連接酶的家蠶中部絲腺生物反應器雙啟動子通用型質粒及其應用與方法。質粒以piggyBac轉座子為基礎并帶有Amp抗性基因,包含有作為外源基因的T4連接酶基因和作為標記基因的綠色熒光EGFP基因的功能表達框,質粒用分子生物學方法構建,且DDDDK與絲素輕鏈基因polyA之間含有ApaI和NheI專一性的兩個酶切位點,采用ApaI和NheI雙酶切通用型質粒,與T4連接酶基因連接后,與輔助質粒共同注射到家蠶受精卵內,利用轉座子特性使綠色熒光蛋白基因和T4連接酶基因導入到家蠶基因組內,并穩定遺傳和表達,獲得轉基因家蠶。本發明借助熒光標志基因篩選轉基因家蠶,利用該家蠶絲腺細胞特異地合成分泌T4連接酶蛋白。
- 專利類型發明專利
- 申請人浙江大學;
- 發明人鐘伯雄;張玉玉;葉露鵬;
- 地址310027 浙江省杭州市西湖區浙大路38號
- 申請號CN201610296590.6
- 申請時間2016年05月04日
- 申請公布號CN105907786A
- 申請公布時間2016年08月31日
- 分類號C12N15/85(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;A01K67/04(2006.01)I;