摘要:本發明公開了一種牛脂肪酸轉運蛋白1基因啟動子熒光素酶質粒的構建方法。首先通過分子克隆方法克隆獲得包含牛FATP1基因第一外顯子的5’側翼啟動子序列,亞克隆至pMD19-T-Promoter載體,再利用KpnI和XhoI限制性內切酶雙酶切后,將其產物純化回收,并連接在pGL3-Basic質粒上,轉化大腸桿菌JM109,挑取鑒定后的陽性克隆子,進行大量制備和保藏。此法構建的包含牛FATP1基因第一外顯子的5’側翼啟動子的熒光素酶質粒(pGL3-Basic-Promoter),可轉染細胞,進行啟動子功能活性分析,以篩選出高效的組織特異性啟動子,克服目前動物基因工程中可利用的組織特異性啟動子數目的不足及調控能力較弱的缺陷。
- 專利類型發明專利
- 申請人貴州大學;
- 發明人許厚強;龔婷;陳偉;陳祥;趙佳福;
- 地址550025 貴州省貴陽市花溪區貴州大學北校區科學技術處
- 申請號CN201310340744.3
- 申請時間2013年08月07日
- 申請公布號CN103509811A
- 申請公布時間2014年01月15日
- 分類號C12N15/66(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;