腦脊液為無色透明的液體，存在于各腦室、蛛網膜下腔和脊髓中央管內，由腦室中的脈絡叢產生，平均每日產生量大約500mL，zui終被吸收在蛛網膜顆粒中。腦脊液充當大腦的緩沖，為顱骨內的大腦提供基本的機械和免疫保護。近幾年來，隨著對腦脊液的研究愈發深入，腦脊液中的某些物質與腫瘤的治療預后間的關系也不斷被發現。其中，腦脊液分泌的外泌體已成為研究的熱點。
單個外泌體表型分析是將免疫學與光學結合的一種新技術[1]。該技術先利用免疫識別將特定的外泌體進行捕獲分離，然后再對目標外泌體的表面標志物及內容物（如攜帶的蛋白質、RNA、DNA及細胞因子）進行定量分析，從而更加全面地反映外泌體的特性。該技術在短短兩年時間，備受廣大科研工作者的關注。本文收集了單個外泌體表型分析技術在腦脊液領域的相關應用，以供參考。
Cancers：腦脊液中的外泌體濃度和miR-21表達的變化可作為軟腦膜轉移病的生物標記物
軟腦膜轉移?。↙M）是通過腦脊液發展到整個神經系統的晚期癌癥的臨床表現。研究顯示LM患者的總生存期約為6-8周，除腦脊液內化學療法外，沒有明確的LM治療方法，但由于低反應率和神經毒性，腦脊液內化學療法的效果值得商榷。同時由于癌細胞量非常少，暫時還沒有比較常規的生物標志物來監測其進展或治療效果。Kyue-Yim Lee等檢測了472名患者和對照組的腦脊液外泌體濃度以及miRNA-21的表達，結果表明外泌體濃度升高的患者的生存期比其他患者長。此外，在預后良好組miRNA-21表達升高。因此，外泌體濃度變化結合microRNA-21表達可能會作為監測LM患者顱內化療療效的生物標志物。
值得注意的是，研究人員使用單個外泌體表型分析技術檢測了腦脊液外泌體增加組和外泌體減少組化療前后外泌體濃度變化，結果表明在腦脊液外泌體降低組中，經過顱內化療后的每種外泌體濃度（CD9 / CD63 / CD81）均顯著降低，而腦脊液外泌體增加組的外泌體濃度沒有顯著改變(圖C和D)。
Exoview檢測腦脊液外泌體增加組和減少組的化療前后外泌體的熒光強度和數量
Cancers：腦脊液分泌的外泌體非編碼RNA是潛在治療軟腦膜轉移病的靶標
軟腦膜轉移?。↙M）是一種致命的癌癥并發癥，其中癌癥通過腦脊液擴散到大腦和脊髓周圍的腦膜，因此腦脊液被認為是診斷LM細胞的新的生物標記物。研究顯示microRNA-21被證實能在細胞間轉移后維持基因調控功能，是癌癥中有效的預后標志物和關鍵治療靶標。Kyue-Yim Lee等通過無偏向多腺苷酸化smRNA文庫的構建和NGS分析得到了來自LM患者腦脊液外泌體的全面smRNA譜，并驗證了smRNA亞群偏向性表達的重要性。此外，作者使用了一種新的基于多功能慢病毒的microRNA-21監測系統和基于生理細胞的方法驗證了microRNA-21的功能在與LM患者的腦脊液外泌體相關的smRNA中是zui重要的。
其中，研究人員使用單個外泌體表型分析技術檢測了來自LM患者和健康志愿者（HC）腦脊液外泌體，結果顯示CD9 / CD63 / CD81抗體捕獲的外泌體的熒光成像以及每個抗體結合外泌體的數量相似（圖B），判斷出外泌體存在于LM患者和HC的腦脊液中。
Exoview檢測LM患者和HS的腦脊液外泌體的熒光強度、數量
在以上的研究中，ExoView系統以高的靈敏度和特異性地檢測了腦脊液外泌體的含量并對其表面蛋白marker進行了準確表征，為腦脊液外泌體的研究提供了新的思路。外泌體對疾病的診斷和治療顯示出了深厚的潛力，具有高的研究價值。在今后的研究中，ExoView的表征，將幫助科學家更深入地了解各種疾病，助力疾病診斷和治療方法的開發。
全自動外泌體熒光檢測分析系統（ExoView R100）簡介
Nanoview所開發的全自動外泌體熒光檢測分析系統（ExoView R100）采用單粒子干涉反射成像傳感器（SP-IRIS）技術，是一款無需純化的全自動的新型外泌體表征設備。該設備能夠提供全 方位的外泌體表征信息，包括顆粒大小、計數、表型與生物標志物共定位等，提供多層次和全面的外泌體測量解決方案。ExoView R100允許研究者直接分析特定群體的外泌體或外囊泡。通過ExoView芯片，客戶能夠直zui接多分析9個不同的樣本，節省成本、時間，并減少純化所帶來的偏差。為了更好的服務您的科研工作，Quantum Design中國也建立了樣機演示實驗室，可以為您提供zui為專業的售前、銷售、售后技術支持，歡迎老師您通過撥打電話010-85120280參觀試用！
參考文獻：
[1] Scherr, S. M., Daaboul, G. G., Trueb, J., Sevenler, D., Fawcett, H., Goldberg, B., ... & U?nlu?, M. S. (2016). Real-time capture and visualization of individual viruses in complex media. ACS nano, 10(2), 2827-2833.
[2] Lee, K. Y., Im J. H, Lin W.W...&Lee C.J.Nanoparticles in 472 Human Cerebrospinal Fluid: Changes in Extracellular Vesicle Concentration and miR-21 Expression as a Biomarker for Leptomeningeal Metastasis during pregnancy. Cancers, 2020, 12(10):2745.
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