美國NanoView公司所開發的全自動外泌體熒光檢測分析系統是一款無需純化的、全自動的可對單個外泌體進行表征分析的全新設備。該設備能夠提供外泌體表征信息，包括外泌體粒徑大小、計數、分布、攜帶蛋白表達、生物標志物（CD9，CD81，CD63等）共定位等。操作簡單，結果可靠。一經推出，便引起了外泌體領域科研工作者的廣泛關注，短短兩年時間在已有50多個實驗室采用該技術，發表重要文獻近百篇。
全自動外泌體熒光檢測分析系統的基本原理是一種基于特異性免疫捕獲技術，允許研究者直接分析特定群體的外泌體或外囊泡。通過配套的試劑盒，客戶一次性能夠分析多達9個不同的樣本，大大節省了時間和經濟成本。全自動外泌體熒光檢測分析系統兼容各種生物樣本，除了純化的外泌體之外，對于血液、尿液、惡性腫瘤、腹水中的外泌體也可直接檢測分析，大大拓展了研究范圍。
ExoView R200參數信息:
- 顆粒大小分辨范圍：大于50 nm（可分析大于40 nm的病毒顆粒）
- 熒光粒徑分辨范圍：大于20 nm
- 所需樣本體積：25 μL
- 激發波長：410 nm，488 nm，555 nm，640 nm
- 可一次檢測16個樣本，每個樣本可同時檢測6個不同亞型及3種生物標記的熒光定位
- 單個樣品檢測時間：8分鐘
- 捕獲抗體：一個芯片多允許6種捕獲抗體（+陰性對照）
- 熒光通道：3個熒光通道
應用方向及主要特征
生物標記物共定位 可量化4種標記物的表達情況 | 計數分析 直接從樣品中計算抗原陽性外泌體的數量，無需提純 |
粒徑分析 高精度統計外泌體的顆粒大小及分布 | 檢測外泌體內容物 使用ExoView Cargo試劑盒可探測外泌體內部核酸的裝載情況，分析裝載率 |
熒光檢測 具備3個熒光通道，能夠探測單個蛋白的結合 | 線性工作流程 9個樣品的全自動分析 |
無須純化 無需擔心純化帶來的誤差，更的測量樣品間表征和表達信息的差異 | 多重樣本分析 可使用6種表面標記物來篩選外泌體 |
粒徑分析
全自動外泌體熒光檢測分析系統能夠對>50 nm的外泌體進行全方面的表征，無論是粒徑尺寸、粒徑分布還是外泌體的亞型均可在一次測試中得到。并且所用來測試的樣本無需進行純化，避免因純化帶來的樣本偏差。
分析不同大小和不同尺度的外泌體亞群，在CD171過表達系統中，100 nm以上的外泌體僅表達了CD171。
量化外泌體亞群
通過抗體捕獲的模式，全自動外泌體熒光檢測分析系統能夠量化含有不同標記物的外泌體亞群，并對不同種群的外泌體進行特異性計數和分析。整個過程無需純化，并且線性范圍可跨越3個數量。
TSPAN8陽性細胞外囊泡的稀釋曲線。使用1:3比例的梯度稀釋。用R2 = 0.9986計算與TSPAN8熒光數據的線性擬合。
檢測外囊泡中的裝載物
MISEV建議在表征外泌體和外囊泡時，應當同時測量表面和載體蛋白。使用ExoView芯片可穿透外泌體，探測膜內蛋白和載體。并且單次可定量3種表面、管腔蛋白。
檢測細胞外泌體內的Syntenin。
WT細胞在未穿膜的條件下幾乎觀測不到Syntenin的信號。進行穿膜處理后可以觀測到Syntenin信號，而KO之后信號消失
生物標志物共定位
全自動外泌體熒光檢測分析系統能夠在單個外泌體樣本上檢測多達4種標記物，并同時提供外泌體的其它表征數據諸如計數、顆粒尺寸統計等。
無需純化
全自動外泌體熒光檢測分析系統只測量含有靶標抗原的特定細胞外泌體群體。僅需35ul的稀釋樣品，即可直接獲得外泌體的表型、l粒徑和計數信息。并且無需擔心污染物對測試的影響。
無論純化與否，Exoview均可進行分析
全自動外泌體熒光檢測分析系統 Kit 配置清單:
ExoView Tetraspanin Kits | CD9 - 捕獲抗體 CD63 - 捕獲抗體 CD81 - 捕獲抗體 Mouse IgG 陰性對照 CD9、CD63、CD81三色共標記熒光抗體。 |
ExoView Tetraspanin Plasma Kits | CD9 - 捕獲抗體 CD63 - 捕獲抗體 CD81 - 捕獲抗體 CD41a - 捕獲抗體 多達三種定制化捕獲抗體 同種陰性對照 CD9、CD63、CD81三色共標記熒光抗體。 |
ExoView Tetraspanin Custom Kits | CD9 - 捕獲抗體 CD63 - 捕獲抗體 CD81 - 捕獲抗體 多達三種定制化捕獲抗體 同種陰性對照 CD9、CD63、CD81三色共標記熒光抗體。 |
ExoView Cargo Kits | 兼容所有ExoView Kit 標準 CD9, CD63和CD81 捕獲抗體 Mouse IgG 陰性對照 ExoView Cargo 試劑 CD9、CD63、CD81三色共標記熒光抗體。 Sytenin熒光抗體 |
用戶單位
中國用戶已發表文章
? 南京大學李靚/張辰宇/張玉婧課題組在《Frontiers in Cell and Developmental Biology》發表文章。
南京大學李靚/張辰宇/張玉婧課題組在《Frontiers in Cell and Developmental Biology》發表文章。
? 上海大學在《Journal of extracellular vesicles》發表文章。
? 中國科學院深圳技術研究院在《Lab on a Chip》發表文章。
? 北京天壇醫院、納米科學中心、北京航空航天大學在《Advanced Science》發表文章。
?同濟大學附屬上海市肺科醫院、上海思路迪轉化醫學在《Journal of Nanobiotechnology》發表文章。
? 山東千佛山醫院在《NANO LETTERS》發表文章
感謝用戶老師對Quantum Design China & NanoView設備的認可與支持！
2022-2023發表文章
? Richard J. R. Kelwick …& Paul S. Freemont. (2023) Opportunities to accelerate extracellular vesicle research with cell-free synthetic biology. Journal of Extracellular Vesicles.
? Laurence Blavier …& Yves A. DeClerck. (2023) The capture of extracellular vesicles endogenously released by xenotransplanted tumours induces an inflammatory reaction in the premetastatic niche. Journal of Extracellular Vesicles.
? Hongyun Wang ……& Junjie Xiao. (2022) Extracellular vesicles enclosed-miR-421 suppresses air pollution (PM2.5)-induced cardiac dysfunction via ACE2 signalling. Journal of Extracellular Vesicles.
? Linglei Jiang……& Santosh Dhakal. (2022) A7 bacterial extracellular vesicle-based intranasal vaccine against SARS-CoV-2 protects against disease and elicits neutralizing antibodies to wild-type and Delta variants. Journal of extracellular vesicles.
? Shaobo Ruan, Nina Erwin, Mei He. (2022) Light-induced high-efficient cellular production of immune functional extracellular vesicles. Journal of extracellular vesicles.
? Nasibeh Karimi ……& Cecilia L?sser. (2022) Tetraspanins distinguish separate extracellular vesicle subpopulations in human serum and plasma – Contributions of platelet extracellular vesicles in plasma samples. Journal of Extracellular Vesicles.
? Heikki Kyykallio ……& Pia R-M Siljander. (2022) A quick pipeline for the isolation of 3D cell culture-derived extracellular vesicles. Journal of Extracellular Vesicles.
? Roberto Frigerio ……& Marina Cretich. (2022) Comparing digital detection platforms in high sensitivity immune-phenotyping of extracellular vesicles. Journal of Extracellular Vesicles.
? Yael Hirschberg ……& Inge Mertens. (2022) Characterizing extracellular vesicles from individual low volume cerebrospinal fluid samples, isolated by SmartSEC. Journal of Extracellular Vesicles.
? Sukhbir Kaur……& David D. Roberts. (2022) Single vesicle analysis of CD47 association with integrins and tetraspanins on extracellular vesicles released by T lymphoblast and prostate carcinoma cells. Journal of Extracellular Vesicles.
? Simone M. Crivelli……& Erhard Bieberich. (2022) Function of ceramide transfer protein for biogenesis andsphingolipid composition of extracellular vesicles. Journal of Extracellular Vesicles.
? Gi Beom Kim …& In-San Kim. (2023) Harnessing Oncolytic Extracellular Vesicles for Tumor Cell-Preferential Cytoplasmic Delivery of Misfolded Proteins for Cancer Immunotherapy. Small.
? J. Klein, Y. Cao. (2023) Multi-Lipid Synergy In Cartilage Lubrication: Redundancy Or Evolution? Osteoarthritis and Cartilage.
Valerie DeLuca …& Michael E. Berens. (2023) Extracellular vesicles as a pharmacodynamic reporter in glioblastoma. Cancer Research.
? Sarah Pike …& Liya Xu. (2023) Extracellular vesicles in diagnostic retinoblastoma aqueous humor correlate with disease stage and clinical outcome: a pilot study.Cancer Research.
? D. Cookson …& Y. Ashraf Kharaz. (2023) The Biological Response Of Anterior Cruciate Ligamentocytes Following Treatment With Synovial Fluid Extracellular Vesicles. Osteoarthritis and Cartilage.
? Mei Lu …& Yuanyu Huang. (2023) Antitumor synergism between PAK4 silencing and immunogenic phototherapy of engineered extracellular vesicles. Acta Pharmaceutica Sinica B.
? Luke C. McIlvenna ……& Martin Whitham. (2023) Single vesicle analysis reveals the release of tetraspanin positive extracellular vesicles into circulation with high intensity intermittent exercise. The Journal of Physiology.
? Joseph Blommer ……& Dimitrios Kapogiannis. (2023) Extracellular vesicle biomarkers for cognitive impairment in Parkinson’s disease. BRAIN.
? Tyler J ……& Atta Behfar. (2022) Exosome biopotentiated hydrogel restores damaged skeletal muscle in a porcine model of stress urinary incontinence. Npj Regenerative Medicine.
? Min Han ……& Tao Xin. (2022) Three-Dimensional-Cultured MSC-Derived Exosome-Hydrogel Hybrid Microneedle Array Patch for Spinal Cord Repair. Nano Letters.
? Zijian Yang ……& David A. Issadore. (2022) Ultrasensitive Single Extracellular Vesicle Detection Using High Throughput Droplet Digital Enzyme-Linked Immunosorbent Assay. Nano Letters.
