細胞培養
細胞培養:也稱細胞克隆技術,通過細胞培養得到大量的細胞或其代謝產物。因為生物產品都是從細胞中得來的,所以可以說細胞培養技術是生物技術中最核心、最基礎的技術。在細胞培養過程中經常會使用促生長因子,例如Insulin、IGF-I、LR3I GF-I和EGF等對細胞生長增殖起到了至關重要的作用。
細胞的生長需要營養環境,用于維持細胞生長的營養基質稱為培養基。培養基按其物理狀態可分為液體培養基和固體培養基。液體培養基用于大規模的工業生產以及生理代謝等基本理論的研究工作。液體培養基中加入一定的凝固劑(如瓊脂)或固體培養物(如麩皮、大米等)便成為固體培養基。固體培養基為細胞的生長提供了一個營養及通氣的表面,在這樣一個營養表面上生產的細胞可形成單個菌落。因此,固體培養基在細胞的分離、鑒定、計數等方面起著相當重要的作用。
從多細胞生物中分離所需要細胞和擴增獲得的細胞以及對細胞進行體外改造,觀察,必須解決細胞離體培養問題,同微生物細胞培養的難易相比,比較困難的是來自多細胞生物的單細胞培養,特別是動物細胞的培養。細胞培養泛指所有體外培養,其含義是指從動物活體體內取出組織,于模擬體內生理環境等特定的體內條件下,進行孵育培養,使之生存并生長。細胞培養工作現已廣泛應用于生物學、醫學、新藥研發等各個領域,成為最重要的基礎科學之一。
細胞培養的一般過程主要包括四個方面:準備工作、取材、培養、凍存及復蘇。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌等;取組織時應嚴格保持無菌,同時也要避免接觸其他的有害物質;培養最重要的是觀察,包括細胞是否生長良好,形態是否正常,有無污染;凍存的溫度一般用液氮的溫度--196℃。
細胞培養的優點:能長期傳代,保持活性,便于監控檢測結構功能和生命活動;培養條件可以人為的控制便于研究細胞代謝、物理、化學、生物因素的影響;可用于各種觀察和檢測手段研究活細胞的變化(變異、分化)??蓮募毎介_展亞細胞結構和代謝分子的表達;研究范圍和細胞來源廣泛,選擇性廣;不同代次細胞可長期保存,既可開展同代次不同條件和方法研究,又可觀察不同代次的動態變化;耗資少、經濟、成本低、可大量培養,利于生物制品的生產。
折疊
缺點:細胞或組織生長在人工環境中,與體內環境存在差異,細胞或組織的形態或功能會發生不同程度的改變。