恒奧德儀器解析電泳儀儀器原理使用方法
電泳儀于1937年研發,常用支持物體有濾紙、醋酸纖維薄膜等。電泳術是分子生物學研究不可缺少的重要分析手段。電泳般分為自由界面電泳和區帶電泳兩大類,自由界面電泳不需支持物,如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等,這類電泳目前已很少使用。
儀器原理
區帶電泳則需用各種類型的物質作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠-G薄層等,分子生物學域中常用的是瓊脂糖凝膠電泳。所謂電泳,是帶電粒子在電場中的運動,不同物質由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運動速度不同,根據這征,應用電泳法便可以對不同物質行定性或定量分析,或將定混合物行組份分析或單個組份提取制備,這在臨床檢驗或實驗研究中具有其重要的意義。電泳儀正是基于上述原理設計制的。
使用方法
1.用導線將電泳槽的兩個電與電泳儀的直流輸出端聯接,注意性不要接反。
2.電泳儀電源開關調至關的位置,電壓旋鈕轉到小,根據作需要選擇穩壓穩流方式及電壓電流范圍。
3.接通電源,緩緩旋轉電壓調節鈕直到達到的所需電壓為止,設定電泳終止時間,此時電泳即開始行。
4.作畢后,應將各旋鈕、開關旋至零位或關閉狀態,并撥出電泳插頭。
注意事項
1.電泳儀通電入作狀態后,禁止人體接觸電、電泳物及其它可能帶電分,也不能到電泳槽內取放東西,如需要應斷電,以免觸電。同時要求儀器須有良好接地端,以防漏電。
2.儀器通電后,不要臨時增加或撥除輸出導線插頭,以防短路現象發生,雖然儀器內附設有保險絲,但短路現象仍有可能導致儀器損壞。
3.由于不同介質支持物的電阻值不同,電泳時所通過的電流量也不同,其泳動速度及泳至終點所需時間也不同,故不同介質支持物的電泳不要同時在同電泳儀上行。
4.在總電流不過儀器額定電流時(大電流范圍),可以多槽關聯使用,但要注意不能載,否則容易影響儀器壽命。
5.某些殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時,允許在穩壓狀態下空載開機,但在穩流狀態下須接好負載再開機,否則電壓表針將大幅度跳動,容易成不要的人為機器損壞。
6.使用過程中發現異?,F象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,行檢修,以免發生意外事故。
研發背景
1937年,瑞典生化學家Tiselius集前人百余年探索電泳現象之大成,發明了Tiselius電泳儀,在此基礎上建立了研究蛋白質的自由界面電泳方法,利用該法次證明人血清是由白蛋白(A)、α、β、γ蛋白組成,并因此于1948年獲得阿果獎。隨后電泳術的發展突飛猛,1949年,RicketlsMarrack等人證明人血清蛋白質經電泳分離可依次分為白蛋白,α1、α2、β、γ蛋白五個組分,1957年Reiner對人血清五個組分蛋白行了定量分析。
但自由界面電泳沒有固定支持介質,擴散和對流作用較強,影響分離效果,于是在50年代相繼出現了固相支持介質電泳。初的支持介質是濾紙和醋酸纖維素膜,目前這些介質在實驗室已經應用較少。在很長段時間里,小分子物質如氨基酸、多肽、糖等通常用濾紙、纖維素或硅膠薄層平板作為介質行電泳分離、分析,但目前般使用靈敏度更的術如效液相色譜法(HPLC)等來行分析。而對于復雜的生物大分子,以濾紙、硅膠或醋酸纖維素膜等作為支持介質行電泳,其分離效果并不理想。于是1959年,Raymond和Weintraub,Davis和Ornstein后利用人合成凝膠作支持介質建立了聚丙烯酰胺凝膠電泳,從而大大提了電泳的分辨率和分離效果,增強了電泳術的發展、滲透及與其他術結合配套的能力。致使各式各樣的電泳術和電泳材料如雨后春筍、競相爭榮,成為當代實驗科學術中品種繁多、應用廣泛、基礎與尖端術皆備的大術。
根據電泳中是否使用支持介質分為自由電泳和區帶電泳。
自由電泳不使用支持介質,電泳在溶液中行。這類電泳又分為非自由界面電泳和自由界面電泳兩類。非自由界面電泳懸浮在溶液中的帶電粒子(如各種細胞)通電后移動,不出現界面,如顯微電泳等。自由界面電泳中被分離物質集中在某層,形成各自的界面而行定性或定量分析。自由界面電泳需要昂貴密的電流儀器,僅在少數殊電泳如等電聚焦電泳和等速電泳中使用。
區帶電泳都使用支持介質,根據支持介質不同分為濾紙電泳、醋纖膜電泳、薄層電泳和凝膠電泳等。此外,根據支持介質的裝置形式不同又可分為水平板式電泳、垂直板式電泳、垂直盤狀電泳、毛細管電脈、橋形電泳和連續流動電泳等。
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