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        1. 教育裝備采購網
          第八屆圖書館論壇 校體購2

          人外周血白細胞DNA的制備

          教育裝備采購網 2017-02-21 10:24 圍觀703次

            【基本原理】

            從全血中制備白細胞DNA,可用水直接破裂血中紅細胞和白細胞的細胞膜及核膜,釋出血紅蛋白、細胞核;再用KI 裂解細胞核并溶解DNA;最后用酚/氯仿除去蛋白質,加無水乙醇使DNA沉淀,經A260/A280檢測DNA含量,再經瓊脂糖電泳鑒定。

            【器材】

            1.離心機

            2.紫外分光光度計

            【試劑】

            1.5mmol/L KI:8.3g KI加H2O到10ml

            2.0.9% NaCl

            3. 氯仿/異戊醇(24:1)

            【操作步驟】

            1.取200μl抗凝血,加入1ml 水。

            2.8000rpm離心5min,棄上清。

            3.沉淀中加入40μl 5mol /L KI,旋渦振蕩30Sec。

            4.加入200μl 0.9% NaCl,然后再加入300μl氯仿/異戊醇,振蕩30Sec。

            5.10 000rpm離心5min。

            6.小心吸取上清液,加入冷無水乙醇1ml。

            7.10 000rpm離心5min,棄無水乙醇。

            8.DNA 樣品自然干燥。

            9.加適量的H2O或TE溶解DNA。

            10.核酸定量測定和電泳鑒定。

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          點擊進入上海創賽科技有限公司展臺查看更多 來源:教育裝備采購網 作者:上海創賽科技有限公司 責任編輯:黃磊 我要投稿
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