擬南芥轉基因
擬南芥轉基因所使用的方法主要是農桿菌介導的轉化(載體法),區別主要是轉化的方法不同,有抽真空,花序浸染和噴霧法使用廣泛。農桿菌介導轉化的基本流程
擬南芥種植→花期(侵染)→共培養→收種→驗證農桿菌制備1)從-80℃冰箱中取出lml農桿菌。2)LB培養基中添加50mg/L的卡那霉素(Kan)和100mg/L的利福平(Rif)。3)把lml農桿菌加入到含有Kan和Rif抗生素的LB培養基中,28℃振蕩10h。4)擬南芥轉基因浸潤液采用的是1/2MS,加蔗糖50g/L,PH值調至5.7。然后在15p壓力下蒸汽滅菌15min,滅菌結束,冷卻后保存于4℃,以待轉基因使用。花序浸染驗證1.種子篩選。將收到的種子種植于含有篩選劑(卡那霉素/潮霉素等)的培養基上,篩選出抗性幼苗。2.PCR。提取擬南芥基因組,進行PCR擴增,核酸電泳觀察有無目的基因。公司為國內各大高校及科研院所提供轉基因技術一體化服務,并可以從DNA、RNA及網絡結構各個水平開展研究和服務。 服務優勢
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服務說明
?、倏蛻粜杼峁簲M南芥品種,或者突變體的種子;②客戶需提供:目的載體的明細(片段大小、篩選抗性、植物抗性等);③另有其他實驗的特殊要求,需要提出。④收到客戶的擬南芥種子及載體后,簽訂協議,項目啟動;