摘要：本發明公開了一套檢測小鼠腸道分節絲狀菌SFB鞭毛蛋白的方法與應用，包括PCR方法、蛋白質變性電泳與免疫印跡方法(SDS?PAGE?Western?blotting)、細菌原位雜交結合免疫組化方法(FISH+IHC)。所述PCR方法為，設計合成了一對能特異性擴增SFB鞭毛蛋白Flic3基因的引物，使用該引物對樣品DNA進行PCR擴增后，可以在凝膠電泳后檢測到與Flic3基因片段大小一致的DNA條帶。所述蛋白質變性電泳與免疫印跡方法為，成功制備了兔抗SFB?Flic3鞭毛蛋白的多克隆抗體，并可以使用該蛋白對樣品中是否存在SFB?Flic3鞭毛蛋白進行檢測。所述細菌原位雜交結合免疫組化方法為使用SFB16S?rRNA基因特異常性探針和兔抗SFB?Flic3鞭毛蛋白多克隆抗體檢測SFB鞭毛蛋白的表達情況、SFB細菌的形態及SFB與腸上皮的相互作用情況。本發明所涉及的檢測方法具有快速、直觀和表象的優點。
- 專利類型發明專利
- 申請人浙江大學;浙江省農業科學院;
- 發明人陳華海;尹業師;王欣;項春生;
- 地址310012 浙江省杭州市西湖區余杭塘路866號
- 申請號CN201610579365.3
- 申請時間2016年07月19日
- 申請公布號CN106011281A
- 申請公布時間2016年10月12日
- 分類號C12Q1/68(2006.01)I;G01N33/68(2006.01)I;G01N27/62(2006.01)I;
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