摘要:本發明涉及一種大腸桿菌工程菌,本發明還提供一種大腸桿菌工程菌的制備方法,步驟是克隆黃孢原毛平革菌木質素過氧化物酶的基因的cDNA,雙酶切上述cDNA,將酶切片段連接pCold-TF載體,鑒定得到的質粒pCold-TF-LiP是否陽性表達,將陽性質粒pCold-TF-LiP導入至大腸桿菌BL21感受態細胞中,獲得表達木質素過氧化物酶的大腸桿菌工程菌,本發明還提供大腸桿菌工程菌的應用,方法是將大腸桿菌工程菌接種于液體培養基,液體培養基中加入氨芐青霉素,培養至OD600為0.58~0.62,加入蛋白誘導劑IPTG,誘導重組蛋白表達,本發明的大腸桿菌工程菌表達量高,活性極強,酶活為3528U/L。
- 專利類型發明專利
- 申請人湖南大學;
- 發明人陳明;晏銘;曾光明;杜長青;張嘉超;魯倫慧;朱藝;賴萃;許飄;武海鵬;
- 地址410082 湖南省長沙市河西岳麓山湖南大學環境科學與工程學院
- 申請號CN201310544399.5
- 申請時間2013年11月06日
- 申請公布號CN103540606A
- 申請公布時間2014年01月29日
- 分類號C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N9/08(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N;