?綠色植物中葉綠素含量是測定植物所需氮含量的重要因素，是植物進行光合作用的關鍵因素，因此對植物的生理學研究也是個重要的考核指標。葉綠素測定儀通過測量葉片在兩種波長范圍內的透光系數來確定葉片當前葉綠素的相對數量,也就是在葉綠素選擇吸收特定波長光的兩個波長區域，根據葉片透射光的量來計算測量值。
葉綠素測定儀的測定原理是根據葉綠體色素提取液對可見光譜的吸收，利用分光光度計在某一特定波長測定其吸光度，即可用公式計算出提取液中各色素的含量。根據朗伯—比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質濃度C和液層厚度L成正比，即A=αCL式中：α比例常數。當溶液濃度以百分濃度為單位，液層厚度為1cm時，α為該物質的吸光系數。各種有色物質溶液在不同波長下的吸光系數可通過測定已知濃度的純物質在不同波長下的吸光度而求得。
若測定葉綠體色素混合提取液中的葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量，只需測定該提取液在三個特定波長下的吸光度A，并根據葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長下的吸光系數可求得其濃度。在測定葉綠素a、b時為了排除類胡蘿卜素的干擾，通常用單色光的波長選擇葉綠素在紅光區的大吸收峰。
在使用葉綠素測定儀進行測量的時候要注意以下7大事項，以保證測量結果的準確性：
1. 測量面積僅為2mm/SPAN>3mm，能夠用來測量比較小的葉子，樣品厚度可以達到1.2mm。中心線指示測量面積的中心。
2. 用手指按住樣品夾，直到發出“滴”的一聲測量值出現在顯示屏上為止。測量值會自動儲存在內存中。
3. 當直接在太陽光下利用儀器時，用身體給儀器遮住陽光，這樣就不會影響測量結果。
4. 不要企圖去測量絕對厚的部分，如葉脈。如果測量的葉片有很多的葉脈，好的辦法是進行幾次測量并取平均值。
5. 如果一系列的“滴滴”聲和“---”閃現在顯示屏上，就是錯誤的執行了測量步驟（樣品夾沒有完全密封，在測量沒有完成之前樣品夾被打開，或者樣本太厚或太?。?。
6. 如果測量值出現小數點閃現、沒有小數點或測量值大于50.0 的情況，說明測量精度不能保證，請重新測量。
7. 如果樣品夾的發射或者接收窗口變臟或者有一些水，就不會有的測量結果。在測量前請先查看樣品夾窗口是否清潔。
