三氯蔗糖又名三氯半乳蔗糖，俗稱蔗糖素，由英國泰萊公司(Tate&Lyie)與倫敦大學共同研制并于1976年申請專利的一種新型甜味劑。由于其具有甜度高(甜度為蔗糖的600倍)、甜味純正等特點，被認為是目前最優秀的功能性甜味劑之一，代表了目前強力甜味劑研究的最高水平。雖然科學家們經過長期的毒理實驗證明其具有較高的安全性，但也有三氯蔗糖可誘發偏頭疼發作的報道。
建立食品中三氯蔗糖的測定方法，可為食品生產企業提供生產性指導，并為質量監督部門提供食品質量監管依據。我國國家標準《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定》中制定了三氯蔗糖的HPLC-ELSD檢測方法。
方法優勢：
迪馬科技在參考國家標準《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定》基礎上，進行了方法優化，推出《食品中三氯蔗糖的測定》方法，該方法：
-
采用固相萃取-高效液相色譜法測定食品中的三氯蔗糖，使用ProElut PLS 固相萃取柱凈化樣品，通過HPLC-ELSD檢測；
-
前處理步驟簡單、凈化效果好、重現性好，定量限7.5 mg/kg，符合《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定》對三氯蔗糖的限量規定；
-
適用于各省市出入境、質檢、疾控、食品藥品檢驗所、第三方檢測機構、食品檢測機構、大型食品生產商、高校和科研院所等。
以下為詳細解決方案，敬請參考！
食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法
1、適用范圍
本方案適用于液態奶、酸奶、醬油、醋、餅干、奶酪、奶茶、可樂和果凍中三氯蔗糖的檢測，方法定量限7.5 mg/kg。
2、標準品配制
標準儲備溶液：準確稱取標準品，用水配制成10 mg/mL的儲備液，吸取一定體積10 mg/mL儲備液用水配成濃度為1000 μg/mL的儲備液。
3、提取
3.1 含蛋白脂肪類液體：液態奶、酸奶、醬油和醋
10 mL樣品，加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液，振蕩2 min，超聲提取5 min，6000 rpm離心5 min，取10 mL上清液，待凈化；
3.2 含蛋白脂肪類固體：餅干、奶酪和奶茶
5 g樣品，加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液，振蕩2 min，超聲提取5 min，6000 rpm離心5 min，取10 mL上清液，待凈化；
3.3 飲料：可樂（量取前超聲排氣泡）
10 mL樣品，加入10 mL 水，混勻，取10 mL，待凈化；
3.4 果凍
5 g樣品，加入5 mL 水，熱水超聲溶解，混勻，趁熱凈化。
注：《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定》中提取液為75%甲醇水溶液，減壓濃縮過程中暴沸嚴重，不易操作。
4、凈化——ProElut 200 mg/6 mL PLS（Cat.#：68012）
|
(1)活 化： |
依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水，棄去流出液； |
|
(2)上 樣： |
將待凈化液加入柱中，棄去流出液（控制流速不超過每秒1滴）； |
|
(3)淋 洗： (4)洗 脫： |
向柱中加入5 mL 20%甲醇水溶液，棄去流出液； 向柱中加入3 mL甲醇，收集流出液； |
|
(5)定 容： |
將洗脫液在50 ℃下減壓蒸干，用流動相定容至1 mL，供HPLC分析。 |
5、色譜條件
色譜柱：Diamonsil C18(2) 150 × 4.6 mm，5 μm（Cat.#：99601）
流速：1.0 mL/min
進樣量：20 μL
柱溫：35 ℃
檢測器：SEDEX LT-ELSD，溫度：40℃，壓力：3.5 bar，Gain：6
流動相：A：水；B：乙腈
梯度設置
|
時間/Min. |
0 |
14 |
15 |
22 |
23 |
30 |
|
A（%） |
89 |
89 |
10 |
10 |
89 |
89 |
|
B（%） |
11 |
11 |
90 |
90 |
11 |
11 |
6、添加回收結果
食品中三氯蔗糖的HPLC檢測的添加回收結果
|
添加水平200 mg/kg |
添加水平20 mg/kg |
添加水平7.5 mg/kg |
空白含量(μg/mL) |
||||
|
回收率(%) |
加標量 |
回收率(%) |
加標量 |
回收率(%) |
加標量 |
||
|
早餐奶 |
99.01 |
10 mg/mL 200 μL |
109.82 |
1000 μg/mL 200 μL |
96.52 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
|
巧克力奶 |
99.70 |
10 mg/mL 200 μL |
100.91 |
1000 μg/mL 200 μL |
95.88 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
|
咖啡奶 |
100.34 |
10 mg/mL 200 μL |
112.34 |
1000 μg/mL 200 μL |
126.00 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
|
養樂多 |
128.83 |
10 mg/mL 200 μL |
— |
— |
— |
— |
130.8 |
|
酸奶 |
— |
— |
105.58 |
1000 μg/mL 200 μL |
123.42 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
|
醬油 |
77.85 |
10 mg/mL 200 μL |
— |
— |
— |
— |
113.48 |
|
醋 |
108.22 |
10 mg/mL 200 μL |
143.64 |
1000 μg/mL 200 μL |
205.47 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
|
餅干 |
— |
— |
102.64 |
1000 μg/mL 100 μL |
103.28 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
|
奶酪 |
— |
— |
88.04 |
1000 μg/mL 100 μL |
82.78 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
|
奶茶 |
— |
— |
101.48 |
1000 μg/mL 100 μL |
169.05 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
|
可樂 |
— |
— |
103.97 |
1000 μg/mL 200 μL |
98.49 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
|
果凍 |
— |
— |
93.89 |
1000 μg/mL 100 μL |
96.27 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法相關產品信息：
|
貨號 |
名稱 |
規格 |
|
樣品前處理 |
||
|
68012 |
ProElut PLS |
200 mg/6 mL, 30/pk |
|
244358 |
12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 |
12位 |
|
4803 |
1,3,6mL柱管通用連接器 |
15/pk |
|
4806 |
考克(控制流量) |
15/pk |
|
99011 |
真空/正壓兩用泵，無油 |
1/pk |
|
99013 |
抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) |
1/pk |
|
30039 |
FitMax針頭式過濾器 Nylon |
13 mm,0.22 μm 100/pk |
|
30040 |
FitMax針頭式過濾器 Nylon |
13 mm,0.45 μm 100/pk |
|
標準品 |
||
|
53-69293-100G |
三氯蔗糖[56038-13-2] |
100 g |
|
色譜柱及保護柱 |
||
|
99601 |
Diamonsil C18(2) |
150 × 4.6 mm，5 μm |
|
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 |
||
|
50101 |
乙腈 HPLC級 |
4 L |
|
50102 |
甲醇 HPLC級 |
4 L |
|
通用色譜產品 |
||
|
52401B |
瓶架/藍色（現貨） |
50孔 |
|
52401A |
瓶架/白色（現貨） |
50孔 |
|
1034 |
樣品瓶（棕色/螺紋） |
2 mL, 100/pk |
|
1035 |
樣品瓶蓋/含墊（已經組裝） |
100/pk |
|
H80465 |
HPLC 進樣針 |
25 μL |
紅色產品貨號#30039、#30040、#1034、#1035火熱促銷中
