三氯蔗糖又名三氯半乳蔗糖,俗稱蔗糖素,由英國泰萊公司(Tate&Lyie)與倫敦大學共同研制并于1976年申請專利的一種新型甜味劑。由于其具有甜度高(甜度為蔗糖的600倍)、甜味純正等特點,被認為是目前最優秀的功能性甜味劑之一,代表了目前強力甜味劑研究的最高水平。雖然科學家們經過長期的毒理實驗證明其具有較高的安全性,但也有三氯蔗糖可誘發偏頭疼發作的報道。
建立食品中三氯蔗糖的測定方法,可為食品生產企業提供生產性指導,并為質量監督部門提供食品質量監管依據。我國國家標準《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的測定》中制定了三氯蔗糖的HPLC-ELSD檢測方法。
方法優勢:
迪馬科技在參考國家標準《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的測定》基礎上,進行了方法優化,推出《食品中三氯蔗糖的測定》方法,該方法:
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采用固相萃取-高效液相色譜法測定食品中的三氯蔗糖,使用ProElut PLS 固相萃取柱凈化樣品,通過HPLC-ELSD檢測;
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前處理步驟簡單、凈化效果好、重現性好,定量限7.5 mg/kg,符合《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的測定》對三氯蔗糖的限量規定;
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適用于各省市出入境、質檢、疾控、食品藥品檢驗所、第三方檢測機構、食品檢測機構、大型食品生產商、高校和科研院所等。
以下為詳細解決方案,敬請參考!
食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法
1、適用范圍
本方案適用于液態奶、酸奶、醬油、醋、餅干、奶酪、奶茶、可樂和果凍中三氯蔗糖的檢測,方法定量限7.5 mg/kg。
2、標準品配制
標準儲備溶液:準確稱取標準品,用水配制成10 mg/mL的儲備液,吸取一定體積10 mg/mL儲備液用水配成濃度為1000 μg/mL的儲備液。
3、提取
3.1 含蛋白脂肪類液體:液態奶、酸奶、醬油和醋
10 mL樣品,加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液,振蕩2 min,超聲提取5 min,6000 rpm離心5 min,取10 mL上清液,待凈化;
3.2 含蛋白脂肪類固體:餅干、奶酪和奶茶
5 g樣品,加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液,振蕩2 min,超聲提取5 min,6000 rpm離心5 min,取10 mL上清液,待凈化;
3.3 飲料:可樂(量取前超聲排氣泡)
10 mL樣品,加入10 mL 水,混勻,取10 mL,待凈化;
3.4 果凍
5 g樣品,加入5 mL 水,熱水超聲溶解,混勻,趁熱凈化。
注:《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的測定》中提取液為75%甲醇水溶液,減壓濃縮過程中暴沸嚴重,不易操作。
4、凈化——ProElut 200 mg/6 mL PLS(Cat.#:68012)
(1)活 化: |
依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水,棄去流出液; |
(2)上 樣: |
將待凈化液加入柱中,棄去流出液(控制流速不超過每秒1滴); |
(3)淋 洗: (4)洗 脫: |
向柱中加入5 mL 20%甲醇水溶液,棄去流出液; 向柱中加入3 mL甲醇,收集流出液; |
(5)定 容: |
將洗脫液在50 ℃下減壓蒸干,用流動相定容至1 mL,供HPLC分析。 |
5、色譜條件
色譜柱:Diamonsil C18(2) 150 × 4.6 mm,5 μm(Cat.#:99601)
流速:1.0 mL/min
進樣量:20 μL
柱溫:35 ℃
檢測器:SEDEX LT-ELSD,溫度:40℃,壓力:3.5 bar,Gain:6
流動相:A:水;B:乙腈
梯度設置
時間/Min. |
0 |
14 |
15 |
22 |
23 |
30 |
A(%) |
89 |
89 |
10 |
10 |
89 |
89 |
B(%) |
11 |
11 |
90 |
90 |
11 |
11 |
6、添加回收結果
食品中三氯蔗糖的HPLC檢測的添加回收結果
添加水平200 mg/kg |
添加水平20 mg/kg |
添加水平7.5 mg/kg |
空白含量(μg/mL) |
||||
回收率(%) |
加標量 |
回收率(%) |
加標量 |
回收率(%) |
加標量 |
||
早餐奶 |
99.01 |
10 mg/mL 200 μL |
109.82 |
1000 μg/mL 200 μL |
96.52 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
巧克力奶 |
99.70 |
10 mg/mL 200 μL |
100.91 |
1000 μg/mL 200 μL |
95.88 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
咖啡奶 |
100.34 |
10 mg/mL 200 μL |
112.34 |
1000 μg/mL 200 μL |
126.00 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
養樂多 |
128.83 |
10 mg/mL 200 μL |
— |
— |
— |
— |
130.8 |
酸奶 |
— |
— |
105.58 |
1000 μg/mL 200 μL |
123.42 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
醬油 |
77.85 |
10 mg/mL 200 μL |
— |
— |
— |
— |
113.48 |
醋 |
108.22 |
10 mg/mL 200 μL |
143.64 |
1000 μg/mL 200 μL |
205.47 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
餅干 |
— |
— |
102.64 |
1000 μg/mL 100 μL |
103.28 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
奶酪 |
— |
— |
88.04 |
1000 μg/mL 100 μL |
82.78 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
奶茶 |
— |
— |
101.48 |
1000 μg/mL 100 μL |
169.05 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
可樂 |
— |
— |
103.97 |
1000 μg/mL 200 μL |
98.49 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
果凍 |
— |
— |
93.89 |
1000 μg/mL 100 μL |
96.27 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法相關產品信息:
貨號 |
名稱 |
規格 |
樣品前處理 |
||
68012 |
ProElut PLS |
200 mg/6 mL, 30/pk |
244358 |
12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 |
12位 |
4803 |
1,3,6mL柱管通用連接器 |
15/pk |
4806 |
考克(控制流量) |
15/pk |
99011 |
真空/正壓兩用泵,無油 |
1/pk |
99013 |
抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) |
1/pk |
30039 |
FitMax針頭式過濾器 Nylon |
13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 |
FitMax針頭式過濾器 Nylon |
13 mm,0.45 μm 100/pk |
標準品 |
||
53-69293-100G |
三氯蔗糖[56038-13-2] |
100 g |
色譜柱及保護柱 |
||
99601 |
Diamonsil C18(2) |
150 × 4.6 mm,5 μm |
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 |
||
50101 |
乙腈 HPLC級 |
4 L |
50102 |
甲醇 HPLC級 |
4 L |
通用色譜產品 |
||
52401B |
瓶架/藍色(現貨) |
50孔 |
52401A |
瓶架/白色(現貨) |
50孔 |
1034 |
樣品瓶(棕色/螺紋) |
2 mL, 100/pk |
1035 |
樣品瓶蓋/含墊(已經組裝) |
100/pk |
H80465 |
HPLC 進樣針 |
25 μL |
紅色產品貨號#30039、#30040、#1034、#1035火熱促銷中