(一)轉移印跡
1.轉移前準備：將濾紙，硝酸纖維素膜(NC)剪成與膠同樣大小，NC 膜浸入蒸餾水中10-20min 后浸入轉移buffer 中平衡30min 。
2.凝膠平衡：將電泳后的SDS-PAGE膠板置于轉移buffer 中平衡30-60min。
3.按圖操作：逐層鋪平，各層之間勿留有氣泡和皺折。
4.開始轉移，連接正負極，蓋好蓋子，接上電源，恒流0.8mA/cm，室溫下轉移1h，轉移后的凝膠再用氨基黑10B染色液染色20min ，然后脫色檢測轉移效果。
(二)免疫染色
1.轉移后的NC膜于5%脫脂奶粉中封閉，4℃過夜。
2.TBS洗膜1-2次，10min/次。
3.加HRP標記的抗體，室溫1h 。
4.TBS洗3次，10min/次。
5.NC膜再轉入DAB顯色液中，置暗處反應，待顯色反應達到最佳程度時，立即用三蒸水洗滌終止反應。
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