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        1. 教育裝備采購網
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          粗多糖含量測定中標準品的選擇

          教育裝備采購網 2016-07-13 09:02 圍觀718次

            多糖是存在于自然界的醛糖和(或)酮糖通過糖苷鍵連接在一起的聚合物(一般10個以上)。多糖是一切有生命的有機體必不可少的成分,它與維持生命的種種生理機能有著密切的聯系。用于粗多糖含量測定的方法有很多,一類是利用了多糖的還原性,測定還原性多糖的方法有3, 5-二硝基水楊酸鹽(DNS)比色法和Somogyi-Nelson法。另一類測定方法,也是現在普遍使用的方法,是利用多糖在強酸性條件下脫水生成糠醛或其衍生物,然后再與酚類或胺類化合物縮合,生成有特殊顏色的物質的這一性質進行測定,這類方法有地衣酚-硫酸法、苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法。

            苯酚-硫酸法是用得較多的方法,苯酚-硫酸試劑可與游離的寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起顯色反應,己糖在490 nm處有最大吸收值,吸收值與糖含量呈線性關系。此法是先用標準糖制作標準曲線后,再通過多糖的顯色反應測定吸光度,然后根據其在曲線上的位置推算出多糖的濃度從而推算其含量。此法操作簡單、快速、靈敏、重復性好,對每種糖僅需制作一條標準曲線。蒽酮-硫酸法是另一種常用的方法,其原理是利用糖類遇濃硫酸脫水后生成糖醛或其衍生物,可與蒽酮試劑縮合,反應后溶液呈藍綠色,于620 nm處有最大吸收,顯色深度與多糖的含量呈線性關系。

            品名:葡聚糖 Dextran

            CAS NO: 9004-54-0

            分子式:C6nH10nO5n

          品牌

          產品名稱型號

          貨 號

          包裝規格

          市場價

          折扣價

          Pefermiker

          葡聚糖5, Dextran,分子量5000

          C16-D104010-25g

          25g

          348.00

          278.00

          Pefermiker

          葡聚糖5, Dextran,分子量5000

          C16-D104010-100g

          100g

          1596.00

          1276.00

          Pefermiker

          葡聚糖5, Dextran,分子量5000

          C16-D104010-500g

          500g

          3987.00

          3189.00

          Pefermiker

          葡聚糖40,Dextran,分子量40000

          C16-D104008-25g

          25g

          142.40

          114.00

          Pefermiker

          葡聚糖40,Dextran,分子量40000

          C16-D104008-100g

          100g

          309.00

          247.00

          Pefermiker

          葡聚糖40,Dextran,分子量40000

          C16-D104008-500g

          500g

          1268.00

          1014.00

            目前,在制作標準曲線的標準品的選用上普遍存在爭議。葡萄糖因為其低廉的價格和方便的來源,一直是研究人員的首選。但當我們深究比色法的原理,發現其本身不能區分單糖和寡糖,所以它的測定結果很大程度上依賴于標準品的選擇。此外,比色法通常用濃硫酸短時間水解粗多糖,對于分子量較小的粗多糖,高濃度的硫酸可以在較短時間內將其水解成寡糖和單糖,但當粗多糖的分子量較大時,水解是很難控制的。比如對香菇粗多糖(分子量500,000~1,000,000)的完全水解就需要4M HCl或2M H2SO4于100℃作用3-6小時。因此如果用葡萄糖做標準曲線,勢必對粗多糖樣品中大分子部分的測量帶來很大的誤差。所以,國內外的學者的研究數據表明:1)對于比色法測定當標準品與被測樣品的結構類似時,得到的結果要準確得多[1];2)用葡萄糖做標準品和用葡聚糖做標準品測粗多糖含量時,前者測的結果不同程度的偏高[2, 3]。這樣看來,用葡萄糖作為測定多糖含量的標準品是不合適的。

            燕麥β-葡聚糖是一種β-(1→3)-(1→4)鍵接的線性葡聚糖,在結構、粘度等其他物理性質上與常見的植物和真菌多糖很相似,適合作為植物、真菌來源多糖含量測定的標準品。但由于多糖純化困難,市面上不少葡聚糖純度較低,不適合作為標準品。

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