采用UPC2/MS/MS分離利培酮的活性對映體代謝物并用于檢測代謝穩定性
Jennifer Simeone、 Yun Alelyunas、 Mark Wrona和Paul Rainville
背景
許多候選藥物及其代謝物都含有一個或多個手性中心。識別和監測可能存在的各種對映體是藥物開發過程中至關重要的一步。眾所周知，超臨界流體色譜(SFC)是一種可進行手性分離的高效技術。此外，SFC還具有許多優勢，例如分析效率高、分離速度快，以及使用的溶劑與MS兼容等。
解決方案
在本技術簡報中，我們展示了利用UPC2®/MS/MS對利培酮的活性代謝物9-羥基利培酮進行對映體分離和檢測。研究人員使用9-羥基利培酮標準品進行方法優化，然后將其應用于在人肝臟微粒體中溫育的利培酮樣品。實驗監測了從母體化合物到羥基代謝物的轉化過程。
本方法被用于分析t在0、15、30、60、90和120 min時淬滅的溫育樣品，以監測從利培酮母體到9-羥基代謝物的轉化過程。圖2顯示了一個示例進樣，其中9-羥基代謝物的兩個預期峰分別位于3.92和4.29 min處。然而，在4.48和4.76 min處還出現了另外兩個峰，它們可能是文獻報道的少量7-羥基利培酮代謝物。1
圖1. 利培酮(上)和R/S 9-羥基利培酮(下)。
圖1展示了采用沃特世(Waters®)Trefoil CEL2 3×150 mm，2.5 μm色譜柱，以甲酸銨改性的甲醇為共溶劑所獲得的非手性利培酮及9-羥基利培酮的R和S構型的優化色譜圖。
圖2. 經利培酮微粒體溫育的利培酮(上) 和羥基利培酮(下)在t = 120處的分析結果。
我們將所獲得的母體化合物、利培酮以及四種羥基代謝物峰的峰面積對應時間函數繪制成圖。如圖3所示，多數母體化合物在30 min內轉化為代謝物。雖然R和S構型無法得到絕對確證，但根據已發表的數據2顯示，該過程更傾向于形成R-9-羥基利培酮。因此，我們推測較早洗脫出的峰為R構型，而第二個峰為S構型。
圖3. 分別在15、30、60、90和120min后淬滅的溫育母體化合物(利培酮)與羥基代謝物的測得峰面積-時間曲線圖。
總結
UPC2與MS檢測的結合有利于利培酮的活性代謝物9-羥基利培酮的對映體分離。分離化合物的不同手性構型是藥物開發過程中至關重要的步驟。此外，我們還證明了合相色譜可成功應用于代謝穩定性研究。
參考文獻
1. G Mannens, ML Huang, W Meuldermans, J Hendirckx, R Woestenborghs, J Heykants. Absorption, metabolism, and excretion of risperidone in humans. Drug Metab Dispos 21: 1134-1141, 1993.
2. N Yasui-Furukori, M Hidestrand, E Spina, G Facciola, MG Scordo, G Tybring. Different Enantioselective 9-Hydroxylation of Risperidone by the Two Human CYP2D6 and CYP3A4 Enzymes. Drug Metab Dispos 29: 1263-1268, 2001.
下載完整方案請點擊：720005181zh_采用UPC2MSMS對利培酮的活性代謝物進行的對映體分離及其在代謝穩定性監測方面的應用.pdf
