關于膠囊鉻超標事件的檢測方法
適應范圍：
本指導原則由APL微波消解儀廠家提供：適用于2012年明膠藥用空心膠囊殼中鉻檢測的應急檢驗。
1、檢驗樣品：
膠囊劑(由明膠、空心膠囊殼裝載的膠囊)。
2、檢驗項目：
明膠空心膠囊中的鉻。
3、檢驗方法：
《中國藥典》2010年版(二部)明膠空心膠囊項下鉻檢查項(P1204)、附錄IV D 原子吸收分光光度法(附錄24)、附錄I E 膠囊劑裝量差異項。
4、儀器
4.2電子天平
4.3 微波消解儀
4.4 電熱板或其他趕酸設備，如：恒溫消解儀、趕酸器等。
5、試劑
5.1 硝酸(優級純)
5.2 鉻單元素標準溶液(1000μg/ml，國家標準物質)
6、空心膠囊殼的制備：
傾出膠囊劑的內容物，膠囊殼用棉棒或小刷試凈(不得損壞囊殼)，放置，待用。
7、膠囊劑中明膠空心膠囊殼中總鉻測定方法：
7.1鉻標準貯備液的制備：取鉻單元素標準溶液(1000μg/ml)，用2%硝酸稀釋制成每1ml含鉻1.0μg的鉻標準貯備液。
7.2標準溶液的制備：分別精密量取鉻標準貯備液適量，用2%硝酸溶液稀釋制成每1ml含鉻0~80ng的對照品溶液。臨用時現配。
7.3供試品溶液的制備：精密稱取本品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐內，加硝酸5~10ml，混勻，浸泡過夜，蓋上內蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解。消解完全后，取消解內罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸汽揮盡并近干，用2%硝酸轉移至50ml量瓶中，并加2%硝酸稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液;同法制備試劑空白溶液，作為空白校正。
7.4 測定： 取供試品溶液與對照品溶液適量，以石墨爐為原子化器，照原子吸收分光光度法(《中國藥典》2010年版(二部)附錄IV D第一法)，在357.9nm的波長處測定，計算，即得。
8、方法驗證：
8.1 線性：制備含鉻的對照品溶液至少5份，濃度依次遞增，最高濃度吸收值應在0.8以下，保證具有較好的線性范圍，相關系數(r)≥0.99。
8.2 準確性：應進行整個實驗過程的(包括前處理)方法學回收率驗證，暫定回收率應為80%-120%的范圍內。每次測定需進行隨行回收試驗。
8.3 重復性
取限度濃度的標準品溶液重復測定5次，吸收度(測定值)的變化范圍(RSD)不得過5%。
8.4 定量限
本方法定量限應不低于0.5mg/kg。
9、注意事項：
9.1微波消解：樣品前處理是試驗中的關鍵步驟，既要保證消解完全，又要保證消解過程樣品中的鉻不損失，因此試驗中建議加入10ml硝酸(優級純)，并需要浸泡過夜后消解。參考消解程序為：5min由室溫升至120℃，維持3min;6min由120℃升至150℃，維持2min;6min由150℃升至180℃，維持20min。
9.2為避免玻璃容器的干擾，試驗中宜采用塑料容量瓶(聚丙烯材質)定容。
9.3不同原子吸收儀試驗參數可能不同，可根據原子吸收儀說明書中推薦程序設 定測定參數(參考石墨爐升溫程序如下：5s升溫至100℃，保持10s;5s升溫至500℃，保持10s;0s升溫至2100℃，保持3s;0s升溫至2200℃，保持2s)
9.4含TiO2的膠囊殼(不透明膠囊)建議在微波消解時，樣品中除加硝酸外可另加0.5ml氫氟酸，其他同供試品溶液制備。
9.5實驗用水：應采用純化水，儲藏水的容器宜用聚丙烯塑料材料制成，不宜選用玻璃容器長期儲存。
9.6 試劑應采用優級純及以上級別試劑。
9.7試驗中所用容器及器皿均需在每次使用前用鹽酸溶液(濃鹽酸：水/1:1)浸泡1h，再用硝酸溶液(濃硝酸：水/1:1)浸泡1h，再用純化水沖洗干凈后使用。微波消解容器應采用儀器清洗程序清洗，不得采用鉻酸清洗液洗滌容器。
9.8可供選擇的鉻元素標準溶液(1000μg/mL)由國家有色金屬及電子材料分析測試中心提供(電話：010-82241362;傳真：010-82241346);也可以由中國計量科學研究院提供(電話：010-64525678-4703)。鉻對照貯備溶液應密封，冷暗處保存。
9.9 結果判斷：標準規定不得過百萬分之二(2mg/kg)。由于微量測定，結果的偏差會較大，一般兩份樣品的相對偏差≤10%，取平均值即可。
9.10 樣品檢測應嚴格遵守《中國藥典》2010年版(二部)“明膠空心膠囊”鉻項下方法試驗，如因試驗需要改變樣品前處理方法及檢測波長，應按照實驗室有關質量管理程序(偏離)進行。
9.11若試劑空白溶液測定值過高(宜不超過標準曲線最低濃度點吸光度值的50%)，應換用空白干擾小的溶液重新試驗。
9.12 注意試驗所需的所有儀器均應在計量檢定合格效期內。
9.13若供試品溶液濃度過高，可稀釋到標準曲線范圍內進行測定。
9.14 由于硬、軟膠囊殼中含有不同比例的甘油(軟膠囊比例較高，甘油：明膠比例可達1:2)，在進行微波消解時，甘油可與硝酸產生反應，容易爆罐，請注意消解時的安全監控，盡量在前處理時預消解。
