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          RNA干擾實驗新方法適于精確高通量分析

          教育裝備采購網 2011-09-22 15:43 圍觀205次

            教育裝備采購網訊:近日,謝曉亮研究組再次發表文章,提出了利用其研究組自身研發的技術——受激拉曼散射利用其研究組自身研發的技術——受激拉曼散射(stimulatedRamanscattering,SRS)顯微技術進行RNA干擾實驗的新方法。

            這種新方法利用無需熒光標記的受激拉曼散射顯微儀進行定量成像,克服了生化分析方法繁瑣的色譜分析等問題,以及CARS顯微方法背景信號高,結果不精確等問題,是一種簡單精確,適用于高通量分析的新技術。在這篇文章中,研究人員就利用這種方法篩選發現了8個在脂肪儲存調控方面的新調控因子。

            肥胖是現代社會的一大病癥,會引起各種慢性疾病,比如II型糖尿病,心血管疾病等等。為了更好的了解肥胖,及其相關的代謝失序問題,我們需要深入分析脂肪在細胞水平和組織水平堆積的調控機制,目前已經進行了一些模式生物的脂肪儲存調控因子的全基因組分析,但是這些還遠遠不夠。

            一般線蟲脂肪儲存調控因子分析方法主要包括傳統的生物化學分析方法,比如進行線蟲的固定染色,熒光成像等,近期一些研究組報道了利用CARS顯微技術來分析。但是這兩種方法都存在一些局限性,生化分析方法需要從線蟲中提取脂肪,進行繁瑣的色譜分析工作,這在基因組水平上是不可能完成,而且使用到的一些有機溶劑也會干擾實驗分析。而利用CARS顯微技術進行分析又存在背景信號高,靈敏度受限等問題。

            這篇文章應用的SRS顯微技術能通過對激光迅速反應,精確調制來去除背景噪音,從而不僅能夠得到與傳統拉曼光譜一樣的譜圖,而且信號強度高了幾個數量級。利用這種方法和RNAi篩選相結合,研究人員就能在生理條件下尋找脂肪儲存調控基因了。經過實驗分析,研究人員從272個基因中找到了9個關鍵調控因子。

            將SRS顯微技術與RNAi技術結合起來,能幫助研究人員在線蟲的活性生理條件下觀察脂肪代謝調控,而且這種方法無需標記,極大的簡化了樣品準備過程,適用于模式生物的細胞追蹤,也有利于高通量篩選分析。

          來源:教育裝備采購網 我要投稿
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