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        1. 教育裝備采購網
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          高效液相色譜法測定降脂減肥顆粒中葛根素含量

          教育裝備采購網 2011-08-16 10:09 圍觀288次

            教育裝備采購網訊:

            相關儀器介紹:

          高效液相色譜儀EX1600

            目的應用高效液相色譜法測定降脂減肥顆粒中葛根素的含量。方法采用Shim-pack-C18柱(5μm,150mm×4.6mm),甲醇-0.1%磷酸(25.3∶74.7)為流動相,流速0.9mL/min,檢測波長為250nm。結果線性范圍為0.114~0.570μg,r=0.9996,回收率為98.74%,RDS=0.67%。結論該方法簡便、準確、靈敏,可用于該制劑的質量控制。

            【關鍵詞】高效液相色譜法;葛根素;降脂減肥顆粒

            降脂減肥顆粒是由何首烏、葛根、三七等10味中藥組成,具有滋補肝腎、養益精血、扶正固本、通絡定痛、健脾豁痰、明目生津、潤腸通便的功效,用于各型高血脂癥、心腦血管硬化、單純性肥胖、習慣性便秘、痔瘡出血。方中葛根為主要藥物。本實驗采用高效液相色譜法對制劑中葛根素進行含量測定,以便更好地控制其產品質量。

            1儀器與試藥

            日本島津LC-10AT高效液相色譜儀,SPD-10A紫外檢測器,KQ-250型超聲波處理器。葛根素對照品購于中國藥品生物制品檢定所(批號0537-9910,HPLC面積歸一化法,測定含量為99.26%);降脂減肥顆粒(6g/袋)由吉林森工健今藥業有限公司提供。其它化學試劑均為國產,AR級。

            2方法與結果

            2.1色譜條件[1]

            色譜柱:Diamonsil-C18柱(5μm,4.6mm×150mm);流動相為甲醇-0.1%磷酸(25.3∶74.7);流速:0.9mL/min;紫外檢測波長:250nm;理論塔板數按葛根素計算,不低于3000;柱溫為室溫。

            2.2對照品溶液的制備

            精密稱取葛根素對照品適量,加甲醇制成每1mL含0.05mg的溶液,搖勻,作為對照品溶液。

            2.3供試品溶液的制備

            取本品20g,研細,取1g,精密稱定,加入30%乙醇30mL,置具塞錐形瓶中,稱定重量,超聲處理20min,放冷,再稱定重量,以30%乙醇補足減失的重量,搖勻,濾過,取續濾液,即得。

            2.4陰性對照溶液的制備

            按處方量制備不含葛根藥材的陰性樣品,按供試品溶液的制備方法制備陰性對照溶液。分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各10μL,注入液相色譜儀中,按上述條件測定。結果表明,陰性對照溶液色譜圖中與對照品位置處無干擾,此法可行(見圖1)。

            2.5線性關系考察

            精密吸取葛根素對照品溶液4、8、12、16、20μL,分別注入高效液相色譜儀中進行分析。以對照品進樣量(μg)為橫坐標,以對照品的峰面積為縱坐標作圖,得一條通過原點的直線,回歸方程為:Y=2490376.534X+19847.951,r=0.9996。結果表明,葛根素在0.114~0.570μg間呈良好的線性關系。

            2.6精密度試驗

            精密吸取供試品溶液連續5次重復進樣,測得相對偏差RSD=0.53%。

            2.7穩定性試驗

            精密吸取供試品溶液在0、2、4、8h分別進樣,結果葛根素峰面積的RSD=0.24%,表明在8h內供試品溶液的葛根素含量穩定。

            2.8重現性試驗

            精密稱取同一批號樣品5份,按供試品溶液的制備方法制備,依法進樣分析,樣品中葛根素含量的RSD=1.05%,表明其重現性良好。

            2.9加樣回收率試驗

            精密稱取葛根素對照品適量,加入已測葛根素含量的降脂減肥顆粒樣品(取約1.0g,精密稱定)中,置具塞錐形瓶中,精密加30%乙醇100mL,按供試品溶液的制備方法制備,進樣,測定,計算回收率。結果見表1。表1回收率試驗測定結果(略)

            2.10含量測定

            按上述方法制備供試品溶液,測定3批降脂減肥顆粒中葛根素的含量,結果見表2。表2降脂減肥顆粒中葛根素含量測定結果(略)

            3討論

            根據葛根素的溶解性,分別以乙醇、30%乙醇為提取溶媒進行試驗,結果表明,以30%乙醇提取制備供試品溶液能使葛根素提取完全,以甲醇為溶媒制備的溶液中雜質峰較少,含量偏低,故選擇以30%乙醇為溶媒制備供試品溶液。

            有關葛根素的高效液相色譜法含量測定方法較多,流動相有采用乙腈、甲醇、水、冰醋酸等系統[2]。我們采用甲醇、水系統,色譜分離效果較為滿意,分離度及峰形對稱性較好。(謝沂楠/編輯)

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