摘要:本發明公開了一種雞生長激素重組蛋白在畢赤酵母中的表達及純化方法,包括以下步驟:(1)從雞垂體中提取總RNA并做反轉錄PCR得到其cDNA,以cDNA為模板,PCR得到雞生長激素的基因片段;(2)利用畢赤酵母構建重組表達載體pPIC9K-cGH;(3)重組表達載體pPIC9K-cGH電轉化畢赤酵母GS115,篩選得到轉基因重組酵母菌株GS115-pPIC9K-cGH;(4)通過甲醇誘導表達,并純化得到雞生長激素重組蛋白,通過細胞活性試驗鑒定其活性。本發明首次實現雞生長激素(cGH)重組蛋白在畢赤酵母中的高效表達,并建立了純化體系,可得到純度較高的具有活性的雞生長激素重組蛋白。該方法操作簡便、產量高、成本低廉,為進一步研究雞生長激素的結構、功能以及生產應用提供了基礎。
- 專利類型發明專利
- 申請人常熟理工學院;
- 發明人郁建鋒;顧志良;何賽;張艷萍;金澤楷;周歡慶;姚麗娟;
- 地址215500 江蘇省蘇州市常熟市南三環路99號
- 申請號CN201610091768.3
- 申請時間2016年02月19日
- 申請公布號CN105695500A
- 申請公布時間2016年06月22日
- 分類號C12N15/81(2006.01)I;C07K14/61(2006.01)I;C07K1/16(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N;