摘要：本發明涉及針對小鼠STAT3基因，構建抑制效率最佳的STAT3shRNA慢病毒干擾載體。針對STAT3基因設計4對shRNA，克隆到慢病毒干擾載體pLenti中，構建出干擾載體PLKO.1-STAT3-shRNA-a1、a2、a3或a4，與包裝外殼蛋白質粒?(pVSV-g)?和包膜質粒(Pax-2)共轉染293T細胞，上清培養液過濾后到病毒懸液，測定病毒滴度后以一定MOI病毒量感染大鼠胸主動脈血管平滑肌細胞，篩選最佳抑制效率的shRNA干擾載體。PLKO.1-STAT3-shRNA-a1、a2、a3或a4經限制性酶切和測序證明基因插入正確，Westernblot法證實PLKO.1-STAT3-shRNA明顯降低細胞內STAT3蛋白的表達。
- 專利類型發明專利
- 申請人上海同科生物科技有限公司;
- 發明人施佳萍;楊艷菊;
- 地址200092 上海市楊浦區赤峰路65號同濟大學科技園805室
- 申請號CN201310370286.8
- 申請時間2013年08月23日
- 申請公布號CN104419731A
- 申請公布時間2015年03月18日
- 分類號C12N15/867(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;
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