【基本原理】
游離狀態的考馬斯亮藍G250 在酸性溶液中呈紅褐色，與蛋白質結合后呈藍色，蛋白質含量與顏色的深淺成正比，經595nm 測定，可作出蛋白質含量與吸光度值的標準曲線，并求出未知樣品的蛋白質濃度。
【器材】
1.可見光分光光度計
2.試管
【試劑】
1.0.9% NaCl
2.蛋白質標準溶液(500μg/ml)：小牛血清白蛋白50mg加生理鹽水至100ml
3.考馬斯亮藍G250溶液：考馬斯亮藍G250 100mg加95%乙醇50ml,加85%(W/V)H3PO4 100ml加蒸餾水至1000ml，置棕色瓶過夜，用雙層濾紙過濾。
【操作步驟】
(一)標準蛋白質曲線的繪制
1.取小試管7支，按下表操作
2.混勻后靜置5min ，以1號為空白，595nm比色。
3.結果處理：以各管光密度為縱坐標。各管所含蛋白質量為橫坐標,制成標準曲線。
(二)蛋白質含量測定
1.按下表操作
2.混勻靜置5min 后，以空白管調零，595nm 室溫比色，根據標準曲線確定樣品中蛋白質含量。
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